Literatür Eczacılık Bilimleri Dergisi

.: DERLEME
Toksikolojide İn Vitro Karaciğer Modelleri
In Vitro Liver Models in Toxicology
Pınar ERKEKOĞLUa, Belma KOÇER GÜMÜŞELa
aFarmasötik Toksikoloji AD, Hacettepe Üniversitesi Eczacılık Fakültesi, Ankara, TÜRKİYE
J Lit Pharm Sci. 2019;8(1):1-17
doi: 10.5336/pharmsci.2018-61664
Makale Dili: TR
Tam Metin
ÖZET
 Karaciğer organizmanın temel metabolik işlevlerinin gerçekleştiği organdır. Birçok kimyasal maddenin hepatotoksik olduğu bilinmektedir. Bir kimyasal maddenin in vivo olarak karaciğer hasarı yapabilme kapasitesi; bu maddenin alımı, biyotransformasyonu ve eliminasyonu sırasında geçirdiği bir seri kompleks hücresel prosese bağlıdır. Ayrıca, karaciğer hasarı yapan pek çok kimyasal madde için hayvan modellerinden elde edilen bilgilerin insana tam olarak ekstrapole edilmesi bazı durumlarda uygun değildir. Bu durumda, in vitro karaciğer sistemlerinin potansiyel hepatotoksik bileşiklerin belirlenmesi ve bunların yarattığı hepatotoksisitenin altında yatan mekanizma veya mekanizmaların araştırılması açısından daha iyi bir deneysel yaklaşımı sağladığı belirtilmektedir. En sık kullanılan in vitro karaciğer modelleri arasında; izole perfüze organ parçaları, karaciğer dilimleri, subselüler fraksiyonlar ve izole ve kültür hepatositler gelmektedir. Son 20-30 yıldır insan veya hayvanlardan elde edilen diferansiye hepatositlerin ve karaciğer dilimlerinin hazırlanma ve kültürlenmeleriyle ilgili çok büyük gelişmeler sağlanmıştır. Ayrıca, izole hepatositlerin ilaç metabolizması ve toksisite çalışmalarında sağlayabilecekleri yararlar hakkında önemli araştırmalar yapılmıştır. Ancak, başta ilaç geliştirme çalışmaları olmak üzere, in vitro çalışmalar in vivo çalışmalara henüz tam bir alternatif değildir. Ayrıca, kültür hepatositlerinde gözlenen erken fenotipik değişiklikler, düşük proliferasyon kapasiteleri ve insan hepatositlerinin bulunma zorlukları gibi bazı sınırlamalar bulunmaktadır. Gelecekte bu çalışmalardan beklenen en büyük gelişme kültür koşullarının iyileştirilerek in vivo koşulları daha iyi taklit edebilmesi ve bu koşullarla daha büyük korelasyon oluşturmasıdır. Bu çalışma kapsamında, toksikolojide kullanılan in vitro karaciğer modellerinden söz edilerek, her modelin kullanım koşulları, avantaj ve dezavantajlarının anlatılması amaçlanmıştır.

Anahtar Kelimeler: İn vitro teknikler; karaciğer; hepatositler; hücresel yapılar
ABSTRACT
 Liver is the organ where the basic metabolic functions of the organism is actualized. Several chemicals are known to be hepatotoxic. The capacity of a chemical to cause liver damage depends on a series of complex biological processes during its uptake, biotransformation and elimination. In addition, for several liver damaging chemicals, the extrapolation of information obtained from animal models to humans is not appropriate in some situations. Under these circumstances, in vitro liver systems provide a better experimental approach for determining the hepatotoxic substances and their mechanism/s of hepatotoxicity. The most widely used in vitro liver models are isolated perfused organ parts, liver slices, subcellular fractions and isolated and cultured hepatocytes. In the last twenty and thirty years, the preparation and culturing of the differentiated hepatocytes and liver slices obtained from animals and humans have intensively developed. Moreover, important research on the advantages of the use of isolated hepatocytes in drug metabolism and toxicity studies have been performed. However, in vitro studies are not still an alternative to in vivo studies, particularly in the field of drug development. In addition, the phenotypic changes observed in cultured hepatocytes, their proliferation capacity and the difficulty in finding human hepatocytes are still the limitations. In the future, the highly expected development is the recruitment of culture conditions for these models to highly mimic in vitro conditions and provide high correlations. In this review, I will mainly focus on in vitro liver models used in toxicology, their utilixation, advantages and disadvantages.

Keywords: In vitro techniques; liver; hepatocytes; cellular structures
REFERANSLAR:
  1. Holme JA, Dybing E. The use of in vitro methods for hazard characterisation of chemicals. Toxicol Lett. 2002;127(1-3):135-41. [Crossref]
  2. Liebsch M, Spielmann H. Currently available in vitro methods used in the regulatory toxicology. Toxicol Lett. 2002;127(1-3):127-34. [Crossref]
  3. Eagle H, Foley GE. The cytotoxic action of carcinolytic agents in tissue culture. Am J Med. 1956;21(5):739-49. [Crossref]
  4. National Toxicology Program (NTP). Report of the International Workshop on In Vitro Methods for Assessing Acute Systemic Toxicity. NTP; 2001. p.137.
  5. Buchwald M. Use of cultured human cells for biochemical analysis. Clin Biochem. 1984; 17(3):143-50. [Crossref]
  6. Erkekoglu P, Elnour A, Kocer-Gumusel B, Bhagavathula A, Shehab A. Cellular and molecular aspects of drug-induced liver toxicity: recent prominent mechanisms. MOJ Toxicol. 2015;1(5):156-61. [Crossref]
  7. Guillouzo A. Liver cell models in in vitro toxicology. Environ Health Perspect. 1998;106 Suppl 2:511-32. [Crossref] [PubMed] [PMC]
  8. Kandárová H, Leta?iová S. Alternative methods in toxicology: pre-validated and validated methods. Interdiscip Toxicol. 2011;4(3):107-13 [Crossref] [PubMed] [PMC]
  9. Guillouzo A, Corlu A, Aninat C, Glaise D, Morel F, Guguen-Guillouzo C. The human hepatoma HepaRG cells: a highly differentiated model for studies of liver metabolism and toxicity of xenobio tics. Chem Biol Interact. 2007;168(1):66-73. [Crossref] [PubMed]
  10. Jaeschke H, Gores GJ, Cederbaum AI, Hinson JA, Pessayre D, Lemasters JJ. Mechanisms of hepatotoxicity. Toxicol Sci. 2002;65(2):166-76. [Crossref] [PubMed]
  11. Bessems M, ?t Hart NA, Tolba R, Doorschodt BM, Leuvenink HG, Ploeg RJ, et al. The isolated perfused rat liver: standardization of a time-honoured model. Lab Anim. 2006;40(3):236-46. [Crossref] [PubMed]
  12. Brouwer KL, Thurman RG. Isolated perfused liver. Pharm Biotechnol. 1996;8:161-92. [Crossref]
  13. Soldatow VY, Lecluyse EL, Griffith LG, Rusyn In vitro models for liver toxicity testing. Toxicol Res (Camb). 2013;2(1):23-39. [Crossref] [PubMed] [PMC]
  14. Ferrero JL, Brendel K. Liver slices as a model in drug metabolism. Adv Pharmacol. 1997;43:131-69. [Crossref]
  15. Fasinu P, Bouic PJ, Rosenkranz B. Liverbased in vitro technologies for drug biotransformation studies-a review. Curr Drug Metab. 2012;13(2):215-24. [Crossref] [PubMed]
  16. Lerche-Langrand C, Toutain HJ. Precisioncut liver slices: characteristics and use for in vitro pharmaco-toxicology. Toxicology. 2000;153(1-3):221-53. [Crossref]
  17. Howard RB, Christensen AK, Gibbs FA, Pesch LA. The enzymatic preparation of isolated intact parenchymal cells from rat liver. J Cell Biol. 1967;35(3):675-84. [Crossref] [PubMed] [PMC]
  18. Berry MN, Friend DS. High-yield preparation of isolated rat liver parenchymal cells: a biochemical and fine structural study. J Cell Biol. 1969;43(3):506-20. [Crossref]
  19. Seglen PO. Preparation of isolated rat liver cells. Methods Cell Biol. 1976;13:29-83. [Crossref]
  20. Strain AJ. Isolated hepatocytes: use in experimental and clinical hepatology. Gut. 1994;35(4):433-6. [Crossref] [PubMed] [PMC]
  21. Graf J, Gautam A, Boyer JL. Isolated rat hepatocyte couplets: a primary secretory unit for electrophysiologic studies of bile secretory function. Proc Natl Acad Sci U S A. 1984;81(20):6516-20. [Crossref] [PubMed] [PMC]
  22. Quistorff B. Gluconeogenesis in periportal and perivenous hepatocytes of rat liver, isolated by a new high-yield digitonin/collagenase perfusion technique. Biochem J. 1985;229(1):221-6. [Crossref] [PubMed] [PMC]
  23. Osypiw JC, Allen RL, Billington D. Subpopulations of rat hepatocytes separated by Percoll density-gradient centrifugation show characteristics consistent with different acinar locations. Biochem J. 1994;304(Pt 2): 617-24. [Crossref] [PubMed] [PMC]
  24. Bhogal RH, Hodson J, Bartlett DC, Weston CJ, Curbishley SM, Haughton E, et al. Isolation of primary human hepatocytes from normal and diseased liver tissue: a one hundred liver experience. PLoS One. 2011;6(3): e18222. [Crossref] [PubMed] [PMC]
  25. Vons C, Pegorier JP, Ivanov MA, Girard J, Melcion C, Cordier A, et al. Comparison of cultured human hepatocytes isolated from surgical biopsies or cold-stored organ donor livers. Toxicol In Vitro. 1990;4(4-5):432-34. [Cross - ref]
  26. Łaba A, Ostrowska A, Patrzałek D, Paradowski L, Lange A. Characterization of human hepatocytes isolated from non-transplantable livers. Arch Immunol Ther Exp (Warsz). 2005;53(5):442-53.
  27. Chesné C, Guyomard C, Fautrel A, Poullain MG, Frémond B, De Jong H, et al. Viability and function in primary culture of adult hepatocytes from various animal species and human beings after cryopreservation. Hepatology. 1993;18(2):406-14. [Crossref]
  28. Fuller BJ, Petrenko AY, Rodriguez JV, Somov AY, Balaban CL, Guibert EE. Biopreservation of hepatocytes: current concepts on hypothermic preservation, cryopreservation, and vitrification. Cryo Letters. 2013;34(4):432-52.
  29. Abdennebi HB, Steghens JP, Margonari J, Ramella-Virieux S, Barbieux A, Boillot O. Evaluation of parenchymal and nonparenchymal cell injury after different conditions of storage and reperfusion. Transpl Int. 1998;11(5):365-72. [Crossref] [PubMed]
  30. Diener B, Utesch D, Beer N, Dürk H, Oesch F. A method for the cryopreservation of liver parenchymal cells for studies of xenobiotics. Cryobiology. 1993;30(2):116-27. [Crossref] [PubMed]
  31. Guillouzo A, Morel F, Fardel O, Meunier B. Use of human hepatocyte cultures for drug metabolism studies. Toxicology. 1993;82(1-3): 209-19. [Crossref]
  32. Steward AR, Dannan GA, Guzelian PS, Guengerich FP. Changes in the concentration of seven forms of cytochrome P-450 in primary cultures of adult rat hepatocytes. Mol Pharmacol. 1985;27(1):125-32. [PubMed]
  33. Donato MT, Viitala P, Rodriguez-Antona C, Lindfors A, Castell JV, Raunio H, et al. CYP2A5/CYP2A6 expression in mouse and human hepatocytes treated with various in vivo inducers. Drug Metab Dispos. 2000;28(11):1321-6. [PubMed]
  34. Pascussi JM, Drocourt L, Gerbal-Chaloin S, Fabre JM, Maurel P, Vilarem MJ. Dual effect of dexamethasone on CYP3A4 gene expression in human hepatocytes. Sequential role of glucocorticoid receptor and pregnane X receptor. Eur J Biochem. 2001;268(24):6346-58. [Crossref] [PubMed]
  35. Westerink WM, Schoonen WG. Phase II en zyme levels in HepG2 cells and cryopreserved primary human hepatocytes and their induction in HepG2 cells. Toxicol In Vitro. 2007;21(8):1592-602. [Crossref] [PubMed]
  36. Kono Y, Yang S, Roberts EA. Extended primary culture of human hepatocytes in a collagen gel sandwich system. In Vitro Cell Dev Biol Anim. 1997;33(6):467-72. [Crossref] [PubMed]
  37. Fardel O, Lecureur V, Guillouzo A. Regulation by dexamethasone of P-glycoprotein expression in cultured rat hepatocytes. FEBS Lett. 1993;327(2):189-93. [Crossref]
  38. Stéphenne X, Najimi M, Sokal EM. Hepatocyte cryopreservation: is it time to change the strategy? World J Gastroenterol. 2010;16(1): 1-14. [PubMed] [PMC]
  39. Pan J, Hong JY, Li D, Schuetz EG, Guzelian PS, Huang W, et al. Regulation of cytochrome P450 2B1/2 genes by diallyl sulfone, disulfiram, and other organosulfur compounds in primary cultures of rat hepatocytes. Biochem Pharmacol. 1993;45(11):2323-9. [Crossref]
  40. Schuetz EG, Li D, Omiecinski CJ, MullerEberhard U, Kleinman HK, Elswick B, et al. Regulation of gene expression in adult rat hepatocytes cultured on a basement membrane matrix. J Cell Physiol. 1988;134(3):309-23. [Crossref] [PubMed]
  41. Schuetz JD, Schuetz EG. Extracellular matrix regulation of multidrug resistance in primary monolayer cultures of adult rat hepatocytes. Cell Growth Differ. 1993;4(1):31-40. [PubMed]
  42. Adams RLP. Work TS, Burton RH. Cell Culture for Biochemists. 1st ed. Amsterdam; New York: Elsevier/North Holland Biomedical Press; 1980. p.292.
  43. Bhatia SN, Balis UJ, Yarmush ML, Toner M. Effect of cell-cell interactions in preservation of cellular phenotype: cocultivation of hepatocytes and nonparenchymal cells. FASEB J. 1999;13(14):1883-900. [Crossref] [PubMed]
  44. Weiskirchen R, Gressner AM. Isolation and culture of hepatic stellate cells. Methods Mol Med. 2005;117:99-113. [Crossref]
  45. Fleischer S, Kervina M. Subcellular fractionation of rat liver. Methods Enzymol. 1974;31:6-41. [Crossref]
  46. Groneberg DA, Grosse-Siestrup C, Fischer A. In vitro models to study hepatotoxicity. Toxicol Pathol. 2002;30(3):394-9. [Crossref] [PubMed]
  47. Guguen-Guillouzo C, Guillouzo A. General review on in vitro hepatocyte models and their applications. Methods Mol Biol. 2010;640:1-40. [Crossref] [PubMed]
  48. Han D, Hanawa N, Saberi B, Kaplowitz N. Mechanisms of liver injury. III. Role of glutathione redox status in liver injury. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 2006;291(1):G1-7. [Crossref] [PubMed]
  49. Macé K, Offord EA, Harris CC, Pfeifer AM. Development of in vitro models for cellular and molecular studies in toxicology and chemoprevention. Arch Toxicol Suppl. 1998;20:227-36. [Crossref] [PubMed]
  50. Stoddart MJ. Mammalian Cell Viability: Methods and Protocols, Methods in Molecular Biology. Vol. 740. 1st ed. New York: Humana Press/Springer; 2011. p.240. [Crossref] [PubMed]
  51. Denizot F, Lang R. Rapid colorimetric assay for cell growth and survival. Modifications to the tetrazolium dye procedure giving improved sensitivity and reliability. J Immunol Methods. 1986;89(2):271-7. [Crossref]
  52. Feoktistova M, Geserick P, Leverkus M. Crystal violet assay for determining viability of cultured cells. Cold Spring Harb Protoc. 2016;2016(4):pdb.prot087379.
  53. Friedrich J, Eder W, Castaneda J, Doss M, Huber E, Ebner R, et al. A reliable tool to determine cell viability in complex 3-d culture: the acid phosphatase assay. J Biomol Screen. 2007;12(7):925-37. [Crossref] [PubMed]
  54. Zuang V. The neutral red release assay: a review. Altern Lab Anim. 2001;29(5):575-99. [PubMed]
  55. Smith CG, Grady JE, Northam JI. Relationship between cytotoxicity in vitro and whole animal toxicity. Cancer Chemother Rep. 1963;30:912. [PubMed]
  56. Reed DJ, Fariss MW, Pascoe GA. Mechanisms of chemical toxicity and cellular protection systems. Fundam Appl Toxicol. 1986;6(4):591-7. [Crossref]
  57. Macé K, Offord EA, Harris CC, Pfeifer AM. Development of in vitro models for cellular and molecular studies in toxicology and chemoprevention. Arch Toxicol Suppl. 1998;20:22736. [Crossref] [PubMed]
  58. Chaudhari P, Prasad N, Tian L, Jang YY. De termination of functional activity of human İPSC-derived hepatocytes by measurement of CYP metabolism. Methods Mol Biol. 2016;1357:383-94. [Crossref] [PubMed]
  59. Neupert D, Glöckner R, Neupert G, Müller D. Ultrastructural changes in hepatocytes of pre cision-cut rat liver slices after incubation for 24 and 48 hours. Exp Toxicol Pathol. 2003;54(56):481-8. [Crossref] [PubMed]
  60. Shen C, Meng Q. Prediction of cytochrome 450 mediated drug-drug interactions by threedimensional cultured hepatocytes. Mini Rev Med Chem. 2012;12(10):1028-36. [Crossref] [PubMed]
  61. Donato MT, Lahoz A, Castell JV, GómezLechón MJ. Cell lines: a tool for in vitro drug metabolism studies. Curr Drug Metab. 2008;9(1):1-11. [Crossref] [PubMed]
  62. Berthou F, Goasduff T, Dréano Y, Ménez JF. Caffeine increases its own metabolism through cytochrome P4501A induction in rats. Life Sci. 1995;57(6):541-9. [Crossref]
  63. Greim H, Andrae U, Forster U, Schwarz L. Application, limitations and research requirements of in vitro test systems in toxicology. Arch Toxicol Suppl. 1986;9:225-36. [Crossref] [PubMed]
  64. Villa P, Bégué JM, Guillouzo A. Effects of erythromycin derivatives on cultured rat hepatocytes. Biochem Pharmacol. 1984;33(24): 4098-101. [Crossref]
  65. Rasmussen MK, Balaguer P, Ekstrand B, Daujat-Chavanieu M, Gerbal-Chaloin S. Skatole (3-methylindole) is a partial Aryl hydrocarbon receptor agonist and induces CYP1A1/2 and CYP1B1 expression in primary human hepatocytes. PLoS One. 2016;11(5): e0154629. [Crossref] [PubMed] [PMC]
  66. Smith MT, Thor H, Orrenius S. Toxic injury to isolated hepatocytes is not dependent on extracellular calcium. Science. 1981;213(4513): 1257-9. [Crossref] [PubMed]
  67. Li AP. Human hepatocytes: isolation, cryopreservation and applications in drug development. Chem Biol Interact. 2007;168(1): 16-29. [Crossref] [PubMed]
  68. Fautrel A, Chesné C, Guillouzo A, de Sousa G, Placidi M, Rahmani R, et al. A multicentre study of acute in vitro cytotoxicity in rat liver cells. Toxicol In Vitro. 1991;5(5-6):543-7. [Crossref]
  69. Ratanasavanh D, Riche C, Begue J, Guillouzo A. Les hepatocytes en culture: utilisation en pharmacotoxicologie. In: Adolphe M, Guillouzo A, eds. Metodes In Vitro en Pharmacotoxicologie. Vol 170. 1 st ed. Paris: Les Editions INSERM; 1998. p.1-16.
  70. Li AP, Lu C, Brent JA, Pham C, Fackett A, Ruegg CE, et al. Cryopreserved human hepatocytes: characterization of drug-metabolizing enzyme activities and applications in higher throughput screening assays for hepatotoxicity, metabolic stability, and drug-drug interaction potential. Chem Biol Interact. 1999;121(1):17-35. [Crossref]
  71. Gómez-Lechón MJ, Lahoz A, Gombau L, Castell JV, Donato MT. In vitro evaluation of potential hepatotoxicity induced by drugs. Curr Pharm Des. 2010;16(17):1963-77. [Crossref] [PubMed]
  72. Persson M, Løye AF, Jacquet M, Mow NS, Thougaard AV, Mow T, et al. High-content analysis/screening for predictive toxicology: application to hepatotoxicity and genotoxicity. Basic Clin Pharmacol Toxicol. 2014;115(1): 18-23. [Crossref] [PubMed]
  73. Amacher DE, Martin BA. Tetracycline-induced steatosis in primary canine hepatocyte cultures. Fundam Appl Toxicol. 1997;40(2):256-63. [Crossref]
  74. Hardwick SJ, Wilson JW, Fawthrop DJ, Boobis AR, Davies DS. Paracetamol toxicity in hamster isolated hepatocytes: the increase in cytosolic calcium accompanies, rather than precedes, loss of viability. Arch Toxicol. 1992;66(6):408-12. [Crossref] [PubMed]
  75. Chan KW, Ho WS. Anti-oxidative and hepatoprotective effects of lithospermic acid against carbon tetrachloride-induced liver oxidative damage in vitro and in vivo. Oncol Rep. 2015;34(2):673-80. [Crossref] [PubMed]

.: Güncel

Giriş

 Parolanızı mı unuttunuz?

 Yeni Kullanıcı  

İletişim

Ortadoğu Reklam Tanıtım Yayıncılık Turizm Eğitim İnşaat Sanayi ve Ticaret A.Ş.

.: Adres

Türkocağı Caddesi No:30 06520 Balgat / ANKARA
Telefon: +90 312 286 56 56
Faks: +90 312 220 04 70
E-posta: info@turkiyeklinikleri.com

.: Yazı İşleri Servisi

Telefon: +90 312 286 56 56/ 2
E-posta: yaziisleri@turkiyeklinikleri.com

.: İngilizce Dil Redaksiyonu

Telefon: +90 312 286 56 56/ 145
E-posta: tkyayindestek@turkiyeklinikleri.com

.: Reklam Servisi

Telefon: +90 312 286 56 56/ 142
E-posta: reklam@turkiyeklinikleri.com

.: Abone ve Halkla İlişkiler Servisi

Telefon: +90 312 286 56 56/ 118
E-posta: abone@turkiyeklinikleri.com

.: Müşteri Hizmetleri

Telefon: +90 312 286 56 56/ 118
E-posta: satisdestek@turkiyeklinikleri.com

1. KULLANIM KOŞULLARI

1.1. http://www.turkiyeklinikleri.com alan adından veya bu alan adına bağlı alt alan adlarından ulaşılan internet sayfalarını (Hepsi birden kısaca "SİTE" olarak anılacaktır) kullanmak için lütfen aşağıda yazılı koşulları okuyunuz. Bu koşulları kabul etmediğiniz takdirde "SİTE"yi kullanmaktan vazgeçiniz. "SİTE" sahibi bu "SİTE"de yer alan veya alacak olan bilgileri, formları, içeriği, "SİTE"'yi, "SİTE" kullanma koşullarını dilediği zaman değiştirme hakkını saklı tutmaktadır.

1.2. Bu "SİTE"'nin sahibi Türkocağı cad. No:30, 06520 Balgat Ankara adresinde ikamet eden Ortadoğu Reklam Tanıtım Yayıncılık Turizm Eğitim İnşaat Sanayi ve Ticaret A.Ş.'dir (bundan böyle kısaca "Türkiye Klinikleri" olarak anılacaktır). "SİTE"'de sunulan hizmetler "Türkiye Klinikleri" tarafından sağlanmaktadır.

1.3. Bu "SİTE"'de sunulan hizmetlerden belirli bir bedel ödeyerek ya da bedelsiz olarak yararlananlar veya herhangi bir şekilde "SİTE"ye erişim sağlayan her gerçek ve tüzel kişi aşağıdaki kullanım koşullarını kabul etmiş sayılmaktadır. İşbu sözleşme içinde belirtilen koşulları "Türkiye Klinikleri" dilediği zaman değiştirebilir. Bu değişiklikler periyodik olarak "SİTE"'da yayınlanacak ve yayınlandığı tarihte geçerli olacaktır. "Türkiye Klinikleri" tarafından işbu sözleşme hükümlerinde yapılan her değişikliği "SİTE" hizmetlerinden yararlanan ve "SİTE"ye erişim sağlayan her gerçek ve tüzel kişi önceden kabul etmiş sayılmaktadır.

1.4. İşbu "SİTE Kullanım Koşulları" 30.03.2014 tarihinde en son değişiklik yapılarak ve web sitesi üzerinden yayınlanarak; "SİTE"yi kullanan her kişi tarafından erişimi mümkün kılınıp yürürlülüğe konmuştur. İşbu "SİTE Kullanım Koşulları" ayrıca, "Türkiye Klinikleri" hizmetlerinden belli bir bedel ödeyerek veya ödemeden yararlanacak olan kullanıcılarla yapılmış ve/veya yapılacak olan her türlü "KULLANICI Sözleşmesi"nin de ayrılmaz bir parçasıdır.

2. TANIMLAR

2.1. "SİTE" : "Türkiye Klinikleri" tarafından belirlenen çerçeve içerisinde çeşitli hizmetlerin ve içeriklerin sunulduğu çevrimiçi (on-line) ortamdan http://www.turkiyeklinikleri.com alan adından ve/veya bu alan adına bağlı alt alan adlarından erişimi mümkün olan web sitesi.

2.2. KULLANICI : "SİTE"ye çevrimiçi (on-line) ortamdan erişen her gerçek ve tüzel kişi.

2.3. LİNK : "SİTE" üzerinden bir başka web sitesine, dosyalara, içeriğe veya başka bir web sitesinden "SİTE"ye, dosyalara ve içeriğe erişimi mümkün kılan bağlantı.

2.4. İÇERİK : "Türkiye Klinikleri" "SİTE"yi ve/veya herhangi bir web sitesinden yayınlanan veya erişimi mümkün olan her türlü bilgi, dosya, resim, rakam, fiyat v.b görsel, yazınsal ve işitsel imgeler.

2.5. "KULLANICI SÖZLEŞMESİ" : "Türkiye Klinikleri"nin sunacağı özel nitelikteki hizmetlerden yararlanacak olan gerçek ve/veya tüzel kişilerle "Türkiye Klinikleri" arasında elektronik ortamda akdedilen sözleşme.

3. HİZMETLERİN KAPSAMI

3.1. "Türkiye Klinikleri", "SİTE" üzerinden sunacağı hizmetlerin kapsamını ve niteliğini belirlemekte tamamen serbesttir.

3.2. "Türkiye Klinikleri" "SİTE" bünyesinde sunulacak servislerden yararlanabilmek için, "KULLANICI"nın "Türkiye Klinikleri" tarafından belirlenecek özellikleri taşıması gereklidir. "Türkiye Klinikleri", bu gerekliliği tek taraflı olarak dilediği zaman değiştirebilir.

3.3. "Türkiye Klinikleri"nin "SİTE" üzerinden belirli bir ücret karşılığı veya ücretsiz olarak vereceği hizmetler sınırlı sayıda olmamak üzere;

- Sağlık sektörüne yönelik bilimsel makaleler, kitaplar ve bilgilendirici yayınları sağlamak.

- - Bilimsel dergilere yönelik makale hazırlama aşamasında biçimsel, istatistikî ve editöryal destek sağlamak.

4. GENEL HÜKÜMLER

4.1. "Türkiye Klinikleri", "SİTE" dâhilinde erişime açtığı hizmetler ve içeriklerden hangisinin ücrete tabi olacağını belirlemekte tamamen serbesttir.

4.2. "Türkiye Klinikleri"'nin sunduğu hizmetlerden yararlananlar ve siteyi kullananlar, yalnızca hukuka uygun ve şahsi amaçlarla "SİTE" üzerinde işlem yapabilirler. Kullanıcıların, "SİTE" dâhilinde yaptığı her işlem ve eylemdeki hukuki ve cezai sorumluluk kendilerine aittir. Her KULLANICI, "Türkiye Klinikleri"nin ve/veya başka bir üçüncü şahsın haklarına tecavüz teşkil edecek nitelikteki herhangi bir iş ve eylemde bulunmayacağını; yazılı, görsel ve işitsel bilgileri açıklamayacağını, "Türkiye Klinikleri"ne açıkladığı ve/veya "SİTE"ye gönderdiği her türlü yazılı, görsel ve işitsel bilginin "Türkiye Klinikleri"ne açıkladığı ve/veya "SİTE"ye gönderdiği sırada her türlü biçimde kullanılması, işlenmesi, saklanması, açıklanması ve üçüncü kişilere karşı ifşa edilmesi konusunda münhasır hak sahibi olduğunu kabul, beyan ve taahhüt eder. "KULLANICI" "SİTE" dâhilinde bulunan resimleri, metinleri, görsel ve işitsel imgeleri, video klipleri, dosyaları, veritabanları, katalogları ve listeleri çoğaltmayacağı, kopyalamayacağı, dağıtmayacağı, işlemeyeceğini, gerek bu eylemleri ile gerekse de başka yollarla "Türkiye Klinikleri" ile doğrudan ve/veya dolaylı olarak rekabete girmeyeceğini kabul ve taahhüt etmektedir.

4.3. "SİTE" dâhilinde üçüncü kişiler tarafından sağlanan hizmetlerden ve yayınlanan içeriklerden dolayı "Türkiye Klinikleri"nin, işbirliği içinde bulunduğu kurumların, "Türkiye Klinikleri" çalışanlarının ve yöneticilerinin, "Türkiye Klinikleri" yetkili satıcılarının sorumluluğu bulunmamaktadır. Herhangi bir üçüncü kişi tarafından sağlanan ve yayınlanan bilgilerin, içeriklerin, görsel ve işitsel imgelerin doğruluğu ve hukuka uygunluğunun taahhüdü bütünüyle bu eylemleri gerçekleştiren üçüncü kişilerin sorumluluğundadır. "Türkiye Klinikleri", üçüncü kişiler tarafından sağlanan hizmetlerin ve içeriklerin güvenliğini, doğruluğunu ve hukuka uygunluğunu taahhüt ve garanti etmemektedir.

4.4. "KULLANICI"lar, "SİTE"yi kullanarak, "Türkiye Klinikleri"nin, diğer "KULLANICI"ların ve üçüncü kişilerin aleyhine hiçbir faaliyette bulunamazlar. "KULLANICI"ların işbu "SİTE Kullanım Koşulları" hükümlerine ve hukuka aykırı olarak gerçekleştirdikleri "SİTE" üzerindeki faaliyetler nedeniyle üçüncü kişilerin uğradıkları veya uğrayabilecekleri zararlardan dolayı "Türkiye Klinikleri"nin doğrudan ve/veya dolaylı hiçbir sorumluluğu yoktur.

4.5. "KULLANICI"lar, "SİTE" dâhilinde kendileri tarafından sağlanan bilgilerin ve içeriklerin doğru ve hukuka uygun olduğunu kabul ve taahhüt etmektedirler. "Türkiye Klinikleri", "KULLANICI"lar tarafından "Türkiye Klinikleri"ne iletilen veya "SİTE" üzerinden kendileri tarafından yüklenen, değiştirilen ve sağlanan bilgilerin ve içeriklerin doğruluğunu araştırma; bu bilgi ve içeriklerin güvenli, doğru ve hukuka uygun olduğunu taahhüt ve garanti etmekle yükümlü ve sorumlu değildir.

4.6. "KULLANICI"lar, "SİTE" dâhilinde Türk Ticaret Kanunu hükümleri uyarınca haksız rekabete yol açacak faaliyetlerde bulunmayacağını, "Türkiye Klinikleri"nin ve üçüncü kişilerin şahsi ve ticari itibarı sarsacak, kişilik haklarına tecavüz ve taarruz edecek fiilleri gerçekleştirmeyeceğini kabul ve taahhüt etmektedir.

4.7. "Türkiye Klinikleri", "SİTE" dâhilinde sunulan hizmetleri ve içerikleri her zaman değiştirebilme hakkını saklı tutmaktadır. "Türkiye Klinikleri", bu hakkını hiçbir bildirimde bulunmadan ve önel vermeden kullanabilir. "KULLANICI"lar, "Türkiye Klinikleri"nin talep ettiği değişiklik ve/veya düzeltmeleri ivedi olarak yerine getirmek zorundadırlar. "Türkiye Klinikleri" tarafından talep edilen değişiklik ve/veya düzeltme istekleri gerekli görüldüğü takdirde "Türkiye Klinikleri" tarafından yapılabilir. "Türkiye Klinikleri" tarafından talep edilen değişiklik ve/veya düzeltme taleplerinin, "KULLANICI"lar tarafından zamanında yerine getirilmemesi sebebiyle doğan veya doğabilecek zararlar, hukuki ve cezai sorumluluklar tamamen kullanıcılara aittir.

4.8. "SİTE" üzerinden, "Türkiye Klinikleri"nin kendi kontrolünde olmayan ve başkaca üçüncü kişilerin sahip olduğu ve işlettiği başka web sitelerine ve/veya "İÇERİK"lere ve/veya dosyalara link verebilir. Bu link'ler sadece referans kolaylığı nedeniyle sağlanmış olup ilgili web sitesini veya işleten kişiyi desteklemek amacıyla veya web sitesi veya içerdiği bilgilere yönelik herhangi bir türde bir beyan veya garanti niteliği taşımamaktadır. "SİTE" üzerindeki linkler vasıtasıyla erişilen web siteleri, dosyalar ve içerikler, bu linkler vasıtasıyla erişilen web sitelerinden sunulan hizmetler veya ürünler veya bunların içeriği hakkında "Türkiye Klinikleri"nin herhangi bir sorumluluğu yoktur.

4.9. "Türkiye Klinikleri", "SİTE" üzerinden "KULLANICILAR" tarafından kendisine iletilen bilgileri "Gizlilik Politikası" ve "KULLANICI Sözleşmesi" hükümleri doğrultusunda kullanabilir. Bu bilgileri işleyebilir, bir veritabanı üzerinde tasnif edip muhafaza edebilir. "Türkiye Klinikleri" aynı zamanda; KULLANICI veya ziyaret edenin kimliği, adresi, elektronik posta adresi, telefonu, IP adresi, "SİTE"nin hangi bölümlerini ziyaret ettiği, domain tipi, tarayıcı (browser) tipi, tarih ve saat gibi bilgileri de istatistiki değerlendirme ve kişiye yönelik hizmetler sunma gibi amaçlarla kullanabilir.

5. FİKRİ MÜLKİYET HAKLARI

5.1. Bu "SİTE" dâhilinde erişilen veya hukuka uygun olarak kullanıcılar tarafından sağlanan bilgiler ve bu "SİTE"nin (sınırlı olmamak kaydıyla tasarım, metin, imge, html kodu ve diğer kodlar) tüm elemanları (Hepsi birden "Türkiye Klinikleri"nin telif haklarına tabi çalışmaları olarak anılacaktır) "Türkiye Klinikleri"ne aittir. Kullanıcılar, "Türkiye Klinikleri" hizmetlerini, "Türkiye Klinikleri" bilgilerini ve "Türkiye Klinikleri"nin telif haklarına tabi çalışmalarını yeniden satmak, işlemek, paylaşmak, dağıtmak, sergilemek veya başkasının "Türkiye Klinikleri"nin hizmetlerine erişmesi veya kullanmasına izin vermek hakkına sahip değildirler. İşbu "SİTE Kullanım Koşulları" dâhilinde "Türkiye Klinikleri" tarafından sarahaten izin verilen durumlar haricinde "Türkiye Klinikleri"nin telif haklarına tabi çalışmalarını çoğaltamaz, işleyemez, dağıtamaz veya bunlardan türemiş çalışmalar yapamaz veya hazırlayamaz.

5.2. İşbu "SİTE Kullanım Koşulları" dâhilinde "Türkiye Klinikleri" tarafından sarahaten yetki verilmediği hallerde "Türkiye Klinikleri"; "Türkiye Klinikleri" hizmetleri, "Türkiye Klinikleri" bilgileri, "Türkiye Klinikleri" telif haklarına tabi çalışmaları, "Türkiye Klinikleri" ticari markaları, "Türkiye Klinikleri" ticari görünümü veya bu SİTE vasıtasıyla sağladığı başkaca varlık ve bilgilere yönelik tüm haklarını saklı tutmaktadır.

6. SİTE KULLANIM KOŞULLARINDA DEĞİŞİKLİKLER

"Türkiye Klinikleri", tamamen kendi takdirine bağlı olarak işbu "SİTE Kullanım Koşulları"nı herhangi bir zamanda "SİTE"'da ilan ederek değiştirebilir. İşbu "SİTE Kullanım Koşulları"nın değişen hükümleri, ilan edildikleri tarihte geçerlilik kazanacaktır. İşbu "SİTE Kullanım Koşulları" kullanıcının tek taraflı beyanları ile değiştirilemez.

7. MUCBİR SEBEPLER

Hukuken mücbir sebep sayılan tüm durumlarda, "Türkiye Klinikleri" işbu "SİTE Kullanım Koşulları", gizlilik politikası ve "KULLANICI Sözleşmesi"nden herhangi birini geç ifa etme veya ifa etmeme nedeniyle yükümlü değildir. Bu ve bunun gibi durumlar, "Türkiye Klinikleri" açısından, gecikme veya ifa etmeme veya temerrüt addedilmeyecek veya bu durumlar için "Türkiye Klinikleri"nin herhangi bir tazminat yükümlülüğü doğmayacaktır. "Mücbir sebep" terimi, ilgili tarafın makul kontrolü haricinde ve "Türkiye Klinikleri"nin gerekli özeni göstermesine rağmen önleyemediği olaylar olarak yorumlanacaktır. Bunu yanında sınırlı olmamak koşuluyla, doğal afet, isyan, savaş, grev, iletişim sorunları, altyapı ve internet arızaları, elektrik kesintisi ve kötü hava koşulları gibi durumlar mücbir sebep olaylarına dâhildir.

8. UYGULANACAK HUKUK VE YETKİ

İşbu "SİTE Kullanım Koşulları" uygulanmasında, yorumlanmasında ve bu "SİTE Kullanım Koşulları" dâhilinde doğan hukuki ilişkilerin yönetiminde yabancılık unsuru bulunması durumunda Türk kanunlar ihtilafı kuralları hariç olmak üzere Türk Hukuku uygulanacaktır. İşbu sözleşmeden dolayı doğan veya doğabilecek her türlü ihtilafın hallinde Ankara Mahkemeleri ve İcra Daireleri yetkilidir.

9. YÜRÜRLÜLÜK VE KABUL

İşbu "SİTE Kullanım Koşulları" "Türkiye Klinikleri" tarafından "SİTE" içersinde ilan edildiği tarihte yürürlülük kazanır. Kullanıcılar, işbu sözleşme hükümlerini "SİTE"yi kullanmakla kabul etmiş olmaktadırlar. "Türkiye Klinikleri", dilediği zaman iş bu sözleşme hükümlerinde değişikliğe gidebilir ve değişiklikler sürüm numarası ve değişiklik tarihi belirtilerek "SİTE" üzerinde yayınlandığı tarihte yürürlülüğe girer.

30.03.2014

Gizlilik Bildirimi

→  Sitemizi ziyaret etmeden önce aşağıda yazılı kullanım ilkelerini mutlaka okumanızı öneririz. Bu şartları kabul etmeniz halinde sitemizden faydalanırken kurallarımıza uymanız yararınıza olacaktır. Lütfen Kullanım İlkelerimizin tamamını okuyunuz.

→  www.turkiyeklinikleri.com Ortadoğu Reklam Tanıtım Yayıncılık Turizm Eğitim İnşaat Sanayi ve Ticaret A.Ş.'ye ait hekimleri sağlık alanında bilgilendirmeye yönelik hazırlanmış bir web sitesidir.

→  www.turkiyeklinikleri.com kullanıcılarının kimliklerine, adreslerine, hizmet sağlayıcılarına ve benzeri bilgilerine erişemez. Bu bilgileri kullanıcılar isterse formlar yoluyla siteye gönderebilirler. Ancak, www.turkiyeklinikleri.com donanım ve yazılım bilgilerinizi toplayabilir. Bu bilgiler arasında şunlar yer alır: IP adresiniz, tarayıcı türü, işletim sistemi, etki alan adı, erişim süreleri ve ilgili web adresleri. www.turkiyeklinikleri.com kullanıcılardan aldığı kişisel bilgileri (isminiz, elektronik posta adresiniz, ev ve iş adresiniz, telefon numaranız, vb.) üçüncü bir kuruma satamaz, kamuoyuna yayınlayamaz, site içinde tutamaz. Alınan bilgiler sitenin ziyaretçi profili, raporlama ve hizmetlerin tanıtımına kaynak olması için yönlendirici özellik taşır.

→  www.turkiyeklinikleri.com sizden aldığı bilgileri şu amaçlar için kullanır:

-Web sitesini iyileştirmek,geliştirmek ve kaliteyi korumak,

-Ziyaretçi profili ve genel istatistik veriler oluşturmak,

-Ziyaretçilerin sitemizi nasıl kullandığı ile ilgili eğilimlerini belirlemek,

-Asılı yayınlar/yazışmalar göndermek,

-Elektronik posta yoluyla basın bültenleri veya bildirimler göndermek,

-Etkinlik ya da yarışma için liste oluşturmak.

→  www.turkiyeklinikleri.com adresini kullanmakla;

-Herhangi bir kullanıcının yasal ve ahlaki olmayan davranışlarından Ortadoğu Reklam Tanıtım Yayıncılık Turizm Eğitim İnşaat Sanayi ve Ticaret A.Ş.'nin sorumlu tutulamayacağını,

-Kullanım ilkelerinin zaman zaman değiştirebileceğini,

-Diğer bağlantı sağladığı ama denetleyemediği sitelerin içeriklerinden veya bilgisayarınıza verecek zararlardan sorumlu olmadığını kabul etmiş sayılırsınız.

→  Aşağıda belirtilen durumlarda Ortadoğu Reklam Tanıtım Yayıncılık Turizm Eğitim İnşaat Sanayi ve Ticaret A.Ş. sitesini kullanıcılara kapatabilir:

-Yanlış, eksik, yanıltıcı ve genel ahlak kurallarına uygun olmayan ifadeleri içeren bilgilerin siteye kaydedilmesi durumunda,

-İstenilen bilgilerin içine ilan, reklam, duyuru, özel veya tüzel kişiliklere hakaret içeren ifadeler kullanıldığında,

-Çeşitli yollarla siteye yapılan saldırılar sırasında

-Virüs nedeniyle sitenin yapısının bozulması durumunda.

→  Kod ve yazılım da dahil, sitede yer alan yazılı, görüntülü ve sesli fikir ürünleri Telif Hakları ile ilgili yasal mevzuat uyarınca güvence altındadır.

→  Ortadoğu Reklam Tanıtım Yayıncılık Turizm Eğitim İnşaat Sanayi ve Ticaret A.Ş.in yazılı izni olmadığı sürece sitede yer alan bilgiler; başka bir bilgisayara yüklenemez, değiştirilemez, çoğaltılamaz, kopyalanamaz, yeniden yayınlanamaz, postalanamaz, dağıtılamaz.

→  Sitede bulunan yazılım ve tasarımların her hakkı Ortadoğu Reklam Tanıtım Yayıncılık Turizm Eğitim İnşaat Sanayi ve Ticaret A.Ş.’ye aittir.

→  Ortadoğu Reklam Tanıtım Yayıncılık Turizm Eğitim İnşaat Sanayi ve Ticaret A.Ş. kullanım ilkelerimizle ilgili yorumlarınızı almaktan memnuniyet duyacaktır. Sitemizi zenginleştirebileceğini düşündüğünüz konuları ya da sitemizle ilgili yaşadığınız bir problem olursa lütfen bizimle paylaşın.

info@turkiyeklinikleri.com

04.04.2014