.: ORİJİNAL ARAŞTIRMA
Crithmum Maritimum L.'nin Farklı Konsantrasyonlarının İnsan Periodontal Ligament Fibroblast Hücreleri Üzerine Etkileri
Effects of Different Concentrations of Crithmum Maritimum L. on Periodontal Ligament Fibroblast Cells
Türkiye Klinikleri J Dental Sci. 2020;26(1):31-5
doi: 10.5336/dentalsci.2019-65336
Makale Dili: TR
Tam Metin
ÖZET
Amaç: Crithmum maritimum L. (C. maritimum L.) antimikrobiyal, antioksidan ve rejeneratif özellikleri olan halofit bir bitkidir. Bu in vitro çalışmada amacımız, bir antioksidan olarak C. Maritimum L.'nin, insan periodontal ligament fibroblast hücrelerine proliferatif etkisini değerlendirmektir. Gereç ve Yöntemler: Periodontal ligament fibroblast hücreleri 96 kuyulu plakalara ekildi. Çalışma grupları, 4, 5, 6, 7, 8, 10, 20, 50, 100 μg/mL C. maritimum L. konsantrasyonlarına 24, 48 ve 72 saat maruz bırakıldı. C. maritimum L. uygulamasından sonra, hücre proliferasyonunu değerlendirmek için XTT analizi gerçekleştirildi. Analiz için kuyulardaki medyum aspire edildi, 100 μL taze medyum ve 50 μL XTT reaksiyon solüsyonu eklendi. 4 saat sonra tüm kuyuların absorbansı 450 nm ve 630 nm'de ELISA okuyucuda okundu ve bu değerler arasındaki fark hesaplanarak net absorbans değerleri belirlendi. Proliferasyon ortalamalarını hesaplamak için test gruplarının absorbans değerlerinin yüzdesi kontrol grubunun yüzdesi ile karşılaştırıldı. Kontrol grubu ile diğer gruplar arasındaki karşılaştırmalar Mann-Whitney-U testi ile yapıldı ve p<0,05 anlamlı olarak kabul edildi. Bulgular: Yirmi dört saat sonra 20 ve 50 μg/mL C. maritimum L. konsantrasyonları uygulanan gruplar ile 48 saat sonunda 5, 6, 10, 20 μg/mL C. maritimum L. uygulanan grupların hücre proliferasyonu kontrol grubundaki hücrelere göre istatistiksel olarak anlamlı bir şekilde arttı (p<0,05). Sonuç: Bu sonuçlar, C. maritimum L.'nin periodontal dokuların rejenerasyonunda rol oynayan periodontal ligament fibroblast hücrelerinin proliferasyonunu artırmasından dolayı periodontal sağlığın korunması amacıyla kullanılabileceğini göstermiştir.
Anahtar Kelimeler: Antioksidanlar; peryodontal bağ; primer hücre kültürü
Amaç: Crithmum maritimum L. (C. maritimum L.) antimikrobiyal, antioksidan ve rejeneratif özellikleri olan halofit bir bitkidir. Bu in vitro çalışmada amacımız, bir antioksidan olarak C. Maritimum L.'nin, insan periodontal ligament fibroblast hücrelerine proliferatif etkisini değerlendirmektir. Gereç ve Yöntemler: Periodontal ligament fibroblast hücreleri 96 kuyulu plakalara ekildi. Çalışma grupları, 4, 5, 6, 7, 8, 10, 20, 50, 100 μg/mL C. maritimum L. konsantrasyonlarına 24, 48 ve 72 saat maruz bırakıldı. C. maritimum L. uygulamasından sonra, hücre proliferasyonunu değerlendirmek için XTT analizi gerçekleştirildi. Analiz için kuyulardaki medyum aspire edildi, 100 μL taze medyum ve 50 μL XTT reaksiyon solüsyonu eklendi. 4 saat sonra tüm kuyuların absorbansı 450 nm ve 630 nm'de ELISA okuyucuda okundu ve bu değerler arasındaki fark hesaplanarak net absorbans değerleri belirlendi. Proliferasyon ortalamalarını hesaplamak için test gruplarının absorbans değerlerinin yüzdesi kontrol grubunun yüzdesi ile karşılaştırıldı. Kontrol grubu ile diğer gruplar arasındaki karşılaştırmalar Mann-Whitney-U testi ile yapıldı ve p<0,05 anlamlı olarak kabul edildi. Bulgular: Yirmi dört saat sonra 20 ve 50 μg/mL C. maritimum L. konsantrasyonları uygulanan gruplar ile 48 saat sonunda 5, 6, 10, 20 μg/mL C. maritimum L. uygulanan grupların hücre proliferasyonu kontrol grubundaki hücrelere göre istatistiksel olarak anlamlı bir şekilde arttı (p<0,05). Sonuç: Bu sonuçlar, C. maritimum L.'nin periodontal dokuların rejenerasyonunda rol oynayan periodontal ligament fibroblast hücrelerinin proliferasyonunu artırmasından dolayı periodontal sağlığın korunması amacıyla kullanılabileceğini göstermiştir.
Anahtar Kelimeler: Antioksidanlar; peryodontal bağ; primer hücre kültürü
ABSTRACT
Objective: Crithmum maritimum L. (C. maritimum L.) is a halophyte plant with antimicrobial, antioxidant and regenerative properties. The aim of this in vitro study was to evaluate the proliferation effects of C. maritimum L. as an antioxidant on human periodontal ligament fibroblast cells. Material and Methods: Periodontal ligament fibroblast cells were seeded in 96-well plates. The study groups were exposed to various concentrations of C. maritimum L., as 4, 5, 6, 7, 8, 10, 20, 50 and 100 μg/mL for 24, 48 and 72 hours. After treatments, the XTT assay was performed to evaluate cell proliferation. To analysis, the medium in the wells was aspirated, 100 μL fresh medium and 50 μL XTT reaction solution were added. After 4 hours, the absorbance of all wells was read at 450 nm and 630 nm with ELISA and the net absorbance values were determined by calculating the difference between these values. The percentage of the absorbance values of the test groups was compared with the percentage of the control group to calculate the average of proliferation. Mann-Whitney- U test was used in comparison between control and other groups and p<0.05 was considered significant. Results: After 24 and 48 hours, cell proliferation of groups treated with 20, 50 μg/mL and 5, 6, 10 and 20 μg/mL C. maritimum L. concentrations respectively were increased statistically significant compared to the control cells (p<0.05). Conclusion: These results indicated that C. maritimum L. could be used to ensure the periodontal healing due to increasing the proliferation of periodontal ligament fibroblast cells that play a role in the regeneration of periodontal tissues.
Keywords: Antioxidants; periodontal ligament; primary cell culture
Objective: Crithmum maritimum L. (C. maritimum L.) is a halophyte plant with antimicrobial, antioxidant and regenerative properties. The aim of this in vitro study was to evaluate the proliferation effects of C. maritimum L. as an antioxidant on human periodontal ligament fibroblast cells. Material and Methods: Periodontal ligament fibroblast cells were seeded in 96-well plates. The study groups were exposed to various concentrations of C. maritimum L., as 4, 5, 6, 7, 8, 10, 20, 50 and 100 μg/mL for 24, 48 and 72 hours. After treatments, the XTT assay was performed to evaluate cell proliferation. To analysis, the medium in the wells was aspirated, 100 μL fresh medium and 50 μL XTT reaction solution were added. After 4 hours, the absorbance of all wells was read at 450 nm and 630 nm with ELISA and the net absorbance values were determined by calculating the difference between these values. The percentage of the absorbance values of the test groups was compared with the percentage of the control group to calculate the average of proliferation. Mann-Whitney- U test was used in comparison between control and other groups and p<0.05 was considered significant. Results: After 24 and 48 hours, cell proliferation of groups treated with 20, 50 μg/mL and 5, 6, 10 and 20 μg/mL C. maritimum L. concentrations respectively were increased statistically significant compared to the control cells (p<0.05). Conclusion: These results indicated that C. maritimum L. could be used to ensure the periodontal healing due to increasing the proliferation of periodontal ligament fibroblast cells that play a role in the regeneration of periodontal tissues.
Keywords: Antioxidants; periodontal ligament; primary cell culture
REFERANSLAR:
- Beertsen W, McCulloch CA, Sodek J. The periodontal ligament: a unique, multifunctional connective tissue. Periodontol 2000. 1997;13: 20-40. [Crossref] [PubMed]
- Seo BM, Miura M, Gronthos S, Bartold PM, Batouli S, Brahim J, et al. Investigation of multipotent postnatal stem cells from human periodontal ligament. Lancet. 2004;364(9429): 149-55. [Crossref]
- Arabacı T, Kermen E, Özkanlar S, Köse O, Kara A, Kızıldağ A, et al. Therapeutic effects of melatonin on alveolar bone resorption after experimental periodontitis in rats: a biochemical and immunohistochemical study. J Periodontol. 2015;86(7):874-81. [Crossref] [PubMed]
- Amor NB, Hamed KB, Debez A, Grignon C, Abdelly C. Physiological and antioxidant responses of the perennial halophyte Crithmum maritimum to salinity. Plant Sci. 2005;168(4):889-99. [Crossref]
- Meot-Duros L, Le Floch G, Magné C. Radical scavenging, antioxidant and antimicrobial activities of halophytic species. J Ethnopharmacol. 2008;116(2):258-62. [Crossref] [PubMed]
- Özcan M. Antioxidant activity of seafennel (Crithmum maritimum L.) essential oil and rose (Rosa canina) extract on antioxidant activity of seafennel (Crithmum maritimum L.) essential oil and rose (Rosa canina) extract on natural olive oilnatural olive oil. Acta Aliment. 2000;29(4):377-84. [Crossref]
- Lequeux C, Lhoste A, Rovere MR, Montastier C, Damour O. Model of in vitro healing to test the influence of dedifferentiated Crithmum maritimum cells on dermal repair and epidermal regeneration. Skin Pharmacol Physiol. 2011;24(2):75-80. [Crossref] [PubMed]
- Williams RC. Periodontal disease. N Engl J Med. 1990;322(6):373-82. [Crossref] [PubMed]
- Kose O, Arabaci T, Kara A, Yemenoglu H, Kermen E, Kizildag A, et al. Effects of melatonin on oxidative stress index and alveolar bone loss in diabetic rats with periodontitis. J Periodontol. 2016;87(5):e82-90. [Crossref] [PubMed]
- Hrishi TS, Kundapur PP, Naha A, Thomas BS, Kamath S, Bhat GS. Effect of adjunctive use of green tea dentifrice in periodontitis patients-A Randomized Controlled Pilot Study. Int J Dent Hyg. 2016;14(3):178-83. [Crossref] [PubMed]
- Wolf M, Lossdörfer S, Abuduwali N, Meyer R, Kebir S, Götz W, et al. In vivo differentiation of human periodontal ligament cells leads to formation of dental hard tissue. J Orofac Orthop. 2013;74(6):494-505. [Crossref] [PubMed]
- Chen LJ, Hu BB, Shi XL, Ren MM, Yu WB, Cen SD, et al. Baicalein enhances the osteogenic differentiation of human periodontal ligament cells by activating the Wnt/β-catenin signaling pathway. Arch Oral Biol. 2017;78:100-8. [Crossref] [PubMed]
- Nizam N, Discioglu F, Saygun I, Bal V, Avcu F, Ozkan CK, et al. The effect of α-tocopherol and selenium on human gingival fibroblasts and periodontal ligament fibroblasts in vitro. J Periodontol. 2014;85(4):636-44. [Crossref] [PubMed]
- Atia A, Barhoumi Z, Mokded R, Abdelly C, Smaoui A. Environmental eco-physiology and economical potential of the halophyte Crithmum maritimum L. (Apiaceae). J Med Plant Res. 2011;5(16):3564-71.
- Siracusa L, Kulisic-Bilusic T, Politeo O, Krause I, Dejanovic B, Ruberto G. Phenolic composition and antioxidant activity of aqueous infusions from Capparis spinosa L. and Crithmum maritimum L. before and after submission to a two-step in vitro digestion model. J Agric Food Chem. 2011;59(23):12453-9. [Crossref] [PubMed]
- Generalić Mekinić I, Blažević I, Mudnić I, Burčul F, Grga M, Skroza D, et al. Sea fennel (Crithmum maritimum L.): phytochemical profile, antioxidative, cholinesterase inhibitory and vasodilatory activity. J Food Sci Technol. 2016;53(7):3104-12. [Crossref] [PubMed] [PMC]
- Pereira CG, Barreira L, da Rosa Neng N, Nogueira JMF, Marques C, Santos TF, et al. Searching for new sources of innovative products for the food industry within halophyte aromatic plants: in vitro antioxidant activity and phenolic and mineral contents of infusions and decoctions of Crithmum maritimum L. Food Chem Toxicol. 2017;107(Pt B):581-9. [Crossref] [PubMed]
- Houta O, Akrout A, Neffati M, Amri H. Phenolic contents, antioxidant and antimicrobial potentials of Crithmum maritimum cultivated in Tunisia Arid zones. J Biol Act Prod Nat. 2011;1(2):138-43. [Crossref]
- Meot-Duros L, Cérantola S, Talarmin H, Le Meur C, Le Floch G, Magné C. New antibacterial and cytotoxic activities of falcarindiol isolated in Crithmum maritimum L. leaf extract. Food Chem Toxicol. 2010;48(2):553-7. [Crossref] [PubMed]
.: İşlem Listesi